HoloMonitor M4采用全息顯微術（digital holographic microscopy），以激光為相干光源，利用干涉原理記錄樣品的相位和振幅信息完成對細胞的成像。因此無需處理細胞，減少人為干預，真正做到無標記無侵入的同時一并獲得單細胞和種群兩個層面的量化參數與高質量的影像與數據。
Figure 1 HoloMonitor M4活細胞成像系統拍攝的細胞分裂過程
Figure 2HoloMonitor M4 活細胞成像系統拍攝的傷口愈合實驗
HoloMonitor M4的六大優勢：
ü無損傷——無需標記或染色，無光毒性，還原記錄細胞真實的生長狀態。
ü體積小——可在培養箱中長期穩定運行，在正常生理狀態下開展延時成像分析。
ü實時性——實時監測單個細胞，同時獲得種群數據并提供完整的細胞形態學參數定量。
ü多數據——可重新分析同一樣品或結果以獲得更多實驗數據。
ü應用廣——可用于細胞增殖，分化，遷徙，凋亡，毒理等方面的研究。
ü智能化——簡潔實用的智能圖像分析軟件，自動對獲得的圖像進行高內涵定量分析。
Figure 3抑制ER-a后的乳腺癌細胞 MCF-7的細胞軌跡對比圖。 來源：Gao, Y., Wang, Z., Hao, Q. et al. Loss of ERα induces amoeboid-like migration of breast cancer cells by downregulating vinculin. Nat Commun 8, 14483 (2017).
相比于其他常見的細胞成像技術，HoloMonitor M4活細胞成像系統不需要對細胞進行染色或標記，避免了對細胞的不必要傷害，因此細胞可以被重復利用與下游研究，提高了細胞的利用率，節省了時間，經費以及珍貴的細胞。同時，實驗結果可以用HoloMonitor M4的其他應用重新分析來獲得新的數據。
HoloMonitor M4活細胞成像儀配備有功能強大的圖像分析軟件App suite，使用簡單明了，包含了精確的圖像處理模塊，不僅能提供細胞的種群信息如數量、細胞融合度、運動遷移距離等，也可以提供單個細胞的多達30多種的形態表征和運動參數，包括面積、厚度、體積、不規則度等。
Figure 4 利用細胞表面粗糙度來區分不同的細胞狀態 來源：Croft, L.V., Mulders, J.A., Richard, D.J., O’Byrne, K. (2019). Digital Holographic Imaging as a Method for Quantitative, Live Cell Imaging of Drug Response to Novel Targeted Cancer Therapies. In: Batra, J., Srinivasan, S. (eds) Theranostics. Methods in Molecular Biology, vol 2054. Humana, New York, NY.
HoloMonitor的相關應用
· 細胞形態（多達30種動態參數）
· 深度單細胞追蹤研究
· 細胞遷移，運動與單細胞跟蹤
· 細胞劃痕實驗|細胞趨化
· 細胞增殖
· 細胞生長|分裂|周期
· 細胞分化
· 藥物效應
· 細胞毒性|細胞凋亡
· 細胞計數
· 細胞質控(QC)
Figure 5 HoloMonitor M4活細胞成像儀的應用
HoloMonitor? M4
· 光源: 外接激光
· 樣品照度: 635 nm, 0.2 mW/cm2
· 物鏡: 20x
· 橫向分辨率: 1 μm
· 視野范圍: 567 μm × 567 μm
· 工作距離: 0.5 – 2 mm
· 自動聚焦范圍: 1.5 mm
· 捕獲速度: 1 圖像/s
· 成像大小: 1024 × 1024 pixels
· 載物臺移動空間: 100×70×10 (x×y×z)
· 載物臺精確度: 5 μm
· 產品尺寸: 290×200×190 mm (長×寬×高)
· 工作空間: 400×270×190 mm (長×寬×高)
· 重量: 5.15 kg
電腦要求
· 操作系統: Windows 10, 64–bit
· 處理器: Intel Core i7 (第八代)
· 儲存: 16 GB RAM (最少8 GB)
· 硬盤: 512 GB SSD (最少256 GB)
· 顯卡: Full HD (min 1920×1080)
· 其他: 2 個USB接口
樣品與工作環境
· 細胞: 單層真核貼壁細胞
· 培養皿規格: 6-, 24-, 96-well, Petri, IBIDI
· 運行溫度: 10-40° C
· 運行濕度: 最大95 %
